Поскольку процесс трансформации затрагивает лишь небольшое количество компетентных клеток, то для их отбора используют селективные маркерные гены, которые, как правило, присутствуют в переносимых в растительные клетки генетических конструкциях наряду с генами целевых признаков. При высеве клеток, подвергнутых трансформации, на пит.среду, содержащую селективный агент, способностью делиться будут обладать только те клетки, в геном которых произошла вставка рекомбинантной ДНК. В генетической инженерии растений чаще всего используют в качестве маркерных генов устойчивости к антибиотикам (например, канамицину, ампицилинц) или гены устойчивости к гербицидам( гены bar или pat). Если целью генетической модификации является получение гербицидоустойчивых форм, то сам целевой ген может выступать в качестве селективного гена.
Имеется еще одна специфическая группа маркерных генов, широко используемая в генетической инженерии растений. Речь идет о так называемых репортерных генах, которые применяют для изучения регуляторных элементов генов: промоторов, энхансеров, терминальных последовательностей. В частности, при исследовании промоторов можно определить их области, связанные с тканеспецифической экспрессией генов, или выделить у них светочувствительные участки и т.д.
Репортерные гены помещают в генетических конструкциях вслед за промотором на месте белок-кодирующей последовательности. Особенностью этих генов является кодирование образования какого-либо фермента, не характерного для изучаемых живых организмов. Важно, чтобы активность этого фермента можно было измерить количественно, с высокой воспроизводимостью и достаточно просто.
Поможем написать любую работу на аналогичную тему