Для рассмотрения отдельного метода в своей курсовой работе я взяла один из мутационных методов – метод отпечатков, или метод реплик, разработанный Тэйтумом и Ледербергом в ходе эксперимента со штаммами E. Coli.
Для выявления и учета мутаций используют разные модельные объекты в том числе и E. coli. Этот модельный объект отличается высокой чувствительностью к мутагену, позволяющей работать с низкими дозами мутагена; хорошей воспроизводимостью результатов; простотой и доступностью постановки опытов.
С помощью E. coli можно изучать частоту спонтанных мутаций разных генов (Н.Н. Орлова, Генетический анализ, стр.262-263).
Для выявления мутаций устойчивости E. Coli к бактериофагу Т1 клетки бактерий высевают на минимальную среду в чашки Петри при таком разведении культуры, чтобы образовались отдельные колонии. Затем при помощи бархатной печатки эти колонии переносят на чашки с нанесенной суспензией частиц фага Т1 (рис. 3). Большая часть клеток исходной чувствительной культуры не будет образовывать колоний, поскольку их лизирует бактериофаг. Вырастут лишь отдельные мутантные колонии, устойчивые к фагу. Подсчитывая число колоний в контрольном и опытном (например, после облучения ультрафиолетовым светом) вариантах, легко определить частоту индуцированных мутаций (И.Ф. Жимулев, Общая и молекулярная генетика, стр. 59).
Рис.3. Метод отпечатков (Ф. Герхардт, Методы общей бактериологии 2 том)
Поможем написать любую работу на аналогичную тему