Данный фермент, открытый А.Сиппелом в 1973 г., катализирует присоединение к свободному З’-ОН-концу одноцепочечных молекул РНК поли(А)-последовательностей (рис. 3).
Поли(А)-полимераза находит применение при подготовке молекул РНК к копированию с них комплементарных ДНК. Этот фермент можно использовать и для введения радиоактивной метки в 3’-конец РНК.
Кроме рассмотренных выше, в экспериментах по клонированию фрагментов ДНК и анализу структуры гибридных ДНК используют большой набор других ферментов нуклеинового обмена. К ним относятся полинуклеотидкиназа, щелочная фосфатаза, 5’-экзонуклеаза фага λ, экзонуклеаза III Е. coli, рибонуклеазы, метилазы и др.
Все используемые при конструировании гибридных молекул ДНК ферменты должны быть высокоочищенными, так как даже незначительные посторонние нуклеазные загрязнения могут приводить к побочным реакциям и резко снижать эффективность получения целевых генетических конструкций. Поэтому изучение ферментов, разработка методов их глубокой очистки, а также поиск новых ферментов, специфически действующих на нуклеиновые кислоты, активно продолжаются. В совокупности многочисленные ферменты, имеющие в качестве субстрата катализируемых ими реакций нуклеиновые кислоты, составляют биохимическую базу экспериментов по конструированию in vitro и анализу гибридных молекул ДНК.
Поможем написать любую работу на аналогичную тему