Составляющие элементы процесса репликации (на примере бактерий)

 В 1956 г. Артур Корнберг наработал 100 кг биомассы бактерий E. coli и

выделил только 0,5 г фермента ДНК-полимеразы.

Основные компоненты для синтеза ДНК in vitro:

1. ДНК-матрица - образец, по которому строится новая цепь ДНК.

2. Дезоксирибонуклеотиды (АТФ, ГТФ, ТТФ, ЦТФ) - то, из чего строятся дочерние

цепи.

3. ДНК-полимераза – фермент, осуществляющий синтез ДНК.

4. Ионы магния – необходимы для работы фермента.

Нативная двуцепочечная ДНК, не имеющая повреждений, не может эффективно использоваться для репликации. Активировать ее можно либо денатурацией щелочью или нагреванием, либо обработкой нуклеазой

определенного типа, которая делает однонитчатые концы, либо внесением одноцепочечных разрывов с помощью эндонуклеаз Во всех случаяхматрицей для синтеза новых цепей служит одноцепочечная ДНК. Затравкой является 3'-ОН конец двуцепочечной ДНК, причем он должен быть спарен с матрицей.

Составляющие элементы процесса репликации (на примере бактерий)

 Топоизомеразы – топоизомераза I и топоизомераза II

Для подготовки хромосомы к репликации работают:

Непосредственно в процессе репликации участвуют

ферменты:

1. Хеликазы

2. Белки инициации репликации DnaА, DnaB, DnaС

3. SSB-белки

4. ДНК-праймаза (РНК-полимераза)

5. ДНК-полимеразы:  ДНК-полимераза I  ДНК-полимераза II ДНК-полимераза III

6. ДНК-лигаза