Под ростом понимают согласованное увеличение количества всех химических компонентов, формирующих клеточные структуры. В период сбалансированного роста удвоение биомассы сопровождается удвоением всех других учитываемых параметров популяции, например количества белка, ДНК, РНК и внутриклеточной воды. В условиях сбалансированного роста легко определить величину скорости роста бактериальной популяции в каждый момент времени, если из-мерить прирост любого компонента клетки по отношению к его исходному количеству. Коэффициент пропорциональности называют удельной скоростью роста (μ). где N – число клеток в единице объема; Х – масса клеток в единице объема; t – время. Зная удельную скорость роста, можно определить время генерации (g – время, необходимое для удвоения числа клеток популяции в часах или минутах).
Если рост клеток в культуре ограничен количеством внесенного в питательную среду компонента, то между его начальной концентрацией и полученной биомассой клеток существует постоянная линейная зависимость (при условии ограничения роста только по одному параметру).
Масса клеток, образованная на единицу использованного компонента среды, представляет собой величину, которую называют экономическим коэффициентом (или выходом биомассы) – Y. Эту величину определяют по уравнению где Х – масса сухого вещества клеток (г/мл культуры), вступившей в стационарную фазу роста; Х0 – масса сухого вещества клеток в 1 мл среды сразу после инокуляции среды; (Х – Х0) – урожай бактериальной культуры (урожай зависит от количества и природы используемых питательных веществ, а также от условий культивирования); (S0 – S) – количество потребленного субстрата.
В лабораторных и промышленных условиях используют два основных способа культивирования микроорганизмов: периодическое (статическое) и непрерывное (проточное).
Рост бактерий в периодической культуре происходит до тех пор, пока содержание какого-нибудь из необходимых им компонентов питательной среды не достигнет минимума, после чего рост прекращается. Несколько фаз роста, сменяющих друг друга: начальную (или лаг-) фазу; экспонен-
циальную, или логарифмическую, фазу; стационарную фазу; фазу отмирания.
Лаг-фаза, или фаза задержанного роста, охватывает промежуток времени между инокуляцией бактерий и достижением ими максимальной скорости деления. Продолжительность фазы определяется факторами: • Начальными условиями культивирования вносимого посевного материала.
• Возрастом посевного материала.
Фаза экспоненциального роста характеризуется постоянной максимальной скоростью деления клеток и скоростью роста. E. coli при 37 С делятся примерно каждые 20 мин.
Стационарная фаза наступает тогда, когда число жизнеспособных клеток достигает максимума и не увеличивается, так как скорость размножения бактерий равна скорости их отмирания. В стационарную фазу роста поведение клеток может регулировать апоптоз. У бактерий E. Coli он осуществляется особым опероном maz, представленным двумя генами: mazE и mazF. Продукт mazF – стабильный цитотоксический белок-киллер, а продукт mazE – нестабильн. белок МazE, разрушающий белок-киллер.
В фазе отмирания происходит экспоненциальное снижение числа живых клеток.
В условиях непрерывного (проточного) культивирования в сосуд, содержащий популяцию бактерий, подается свежая питательная среда и из него одновременно удаляется часть среды с клетками микроорганизмов. Хемостат состоит из сосуда-культиватора, в который с заданной постоянной скоростью поступает питательная среда. Примером хемостата в природе служит рубец жвачных животных. Турбидостат представляет собой ферментер, в котором поддерживается заданная плотность клеток за счет определения оптической плотности среды культивирования. Биореакторы, или ферментеры в пром.Культуры, в которых все клетки находятся на одинаковой стадии клеточного цикла и делятся одновременно, называют синхронными.
Поможем написать любую работу на аналогичную тему