Что такое резус-фактор и его значение при гемотрансфузии? Определение резус-фактора экспресс-методом.

Ответ № 1:

Резус-фактор – это содержание особого белка в крови.

Rh-фактор – это белковый антиген, содержащийся в эритроцитах людей и обезьян типа макака-резус.

В 1940 г. Ланштейнером и Винером были выявлены и обнаружены у обезьяны макаки – резус. Большинство людей (85 %) являются носителями резус-фактора (Rh+), 12-13 % - не имеют этого фактора (Rh-).

При переливании крови мы должны учитывать Rh-фактор, определяя его в крови донора и крови реципиента. Если это не учитывать => резус конфликт, что часто приводит к смертельному исходу (т.е. если Rh- больному перелить Rh+ кровь, то вырабатываются антитела – агглютинины, и если повторно перелить ему Rh+ кровь, то произойдет агглютинация, следовательно, анафилактический шок, смерть). Rh имеет значение и при беременности: если мать Rh-, а плод Rh+ - вырабатываются антитела. Особенно тяжело при второй беременности.

Определение Rh-фактора в крови:

I способ: На тарелку капаем каплю сыворотки антирезус (содержит антитела) (левая), рядом капаем вторую каплю сыворотки контрольной (правая). Рядом помещаем капли крови из пальца больного, объем их – половина капли сыворотки. Размешиваем палочкой, покачиваем. Через 3-4 мин. в обе капли добавляем NaCl 0,9 %, на пятой минуте учитываем результат. Если в левой капле – агглютинация, а в правой нет, то Rh+. Нет агглютинации в обеих каплях – Rh–. 

  Ответ № 2:

В 1940 г. Ланштейнером и Винером были выявлены, обнаружены у обезьяны макаки – резус. Большинство людей являются носителями резус-фактора и называются Rh+, 12-13 % не имеют этого фактора – Rh–. Может быть 6 антигенов-резус. Rh белкового происхождения находятся на поверхности эритроцитов – антиген. При переливании крови, кроме агглютиногенов А и В следует учитывать Rh-фактор – резус-агглютиноген врожденное свойство эритроцитов человека обусловленное присутствием в них антигенов-резус. Rh не зависит от признаков др. групповых систем, передается по наследству и не меняется в течении всей жизни (6 антигенов: Д, С, Е, d, c,e). Rh имеет значение при переливании крови и беременности (если мать Rh(-), а плод Rh(+) – вырабатываются антитела. Особенно тяжело при повторной беременности).

Если Rh(-) больному перелить Rh(+) кровь, то вырабатываются антитела (агглютинины) и если повторно перелить ему Rh(+) кровь, то произойдет агглютинация, анафилактический шок, смерть.

Применяют 5 экспресс- методов:

Для определения нужен универсальный реагент антирезус, стандартные Rh(+) и Rh(-) эритроциты для контроля, пробирки, пипетки Пастера, 0,9 % р-р NaCl. Для определения Rh могут быть использована свежая несвернувшаяся кровь из пальца непосредственно перед исследованием или консервированная без всякой предварительной обработки, и также эритроциты из пробирки после образования сгустка и отстаивания сыворотки.

1. Полиглюкиновый экспресс-метод: на дно пробирки нанести 1 каплю стандартного реагента антирезус, разведенного 30 % р-ром полиглюкина и каплю исследуемой крови, перемешать встряхиванием и медленно поворачивать, наклоняя пробирку почти до горизонтального положения, чтобы содержимое растеклось по стенке пробирки (получается более выраженная реакция). Агглютинация наступает в течении первой минуты. Однако для получения четко выраженной агглютинации (учитывая возможность слабо выраженной агглютинобельности эритроцитов) следует продолжать не менее 3-х мин. Затем для исключения неспецифической агглютинации эритроцитов необходимо добавить 2-3 мл 0,9 % NaCl и перемешать не взбалтывая, а 2-3 раза поворачивая пробирку. Оценивается визуально. Одновременно с исследованием крови донора проводится контрольное исследование стандартных эритроцитов Rh(+) и Rh(-), обязательно одногруппных с исследуемой кровью. Оценка результата: наличие агглютинации в виде крупных хлопьев – из эритроцитов на фоне просветленной жидкости указывает на Rh(+) реакцию исследуемой крови, отсутствие агглютинации (гомогенно окрашенная жидкость в пробирке) – Rh(-). Результат учитывается как истинный после проверки контрольных образцов, т.е. при (+) результате со стандартным Rh(+) эритроцитами и отсутствие агглютинации со стандартными Rh(-) эритроцитами.

2. Альбуминовый экспресс-метод: 1967 г. Основан на использовании сывороток антирезус, разведенных 20-30 % р-ром альбумина, в присутствии которого сыворотки подобно групповым приобретают способность агглютинировать эритроциты на плоскости при комнатной tо. Исследование проводят одновременно с определением групп крови на той же пластинке. Под соответствующим обозначением помещают по одной капле тестовой и контрольной сывороток. Последней служит разведенная альбумином сыворотка группы АВ(IV), не содержащая Rh-антител. К сывороткам добавляют исследуемую кровь в количестве ½ объема взятой сыворотки и перемешивают, кровь берут из пальца, а также используют эритроциты со дна пробирки после центрифугирования. Пластинку покачивают в течении 3-4 мин., добавляют одну каплю 0,9 % р-ра NaCl и учитывают реакцию. При наличии агглютинации – Rh(+), при отсутствии – Rh(-).

3. Фициновый экспресс-метод: 1967 г. Кровь с пальца (0,01 мл) в начале помещают в равный объем 1-1,5 % р-р фицина, а затем переливают с 0,02 мл сыворотки антирезус, разведенный низкомолекулярным декстратом с отношением молекулярной массы 2000-5000. Реакцию проводят на фарфоровых пластинах. Агглютинация Rh(+) эритроцитов появляется быстро и выражено.

Другой вариант: капли тестовых реактивов высушивают на специальных картонных карточках, имеющих полимерное покрытие. Карточки хранят в герметичных конвертах. Перед исследованием высушенные реактивы растворяют каплями воды, добавляют исследуемую кровь с фицином, карточку после реакции подсушивают и используют в качестве документа.

4. Протелиновый экспресс-метод: 1970 г. На пластинку в две точки наносят по 1 капле 50 % взвеси испытуемых эритроцитов или крови и добавляют по 1 капле 1-2 % р-ра протелина. Через 1 мин. к 1 капле добавляют сыворотку антирезус; другая капля – контроль. Результат учитывают через 5 мин. с момента добавления сыворотки антирезус (при легком покачивании), результат – в капле с сывороткой антирезус наблюдается агглютинация эритроцитов (Rh(+)).

5. Гепариновый экспресс-метод: 1962 г. Основан на использовании сывороток антирезус, к которым предварительно добавлен гепарин. На предметное стекло помещают каплю сыворотки и небольшую каплю цельной крови. Предметное стекло покачивают 5 мин., слегка нагревая под настольной лампой, читают результат. Rh(+) эритроциты показывают четкую агглютинацию.